Анализ импульсной синхронизации
-
Импульсный анализ в биохимии и молекулярной биологии
- Метод изучения клеточных процессов с течением времени
- Последовательное воздействие меченого соединения (pulse) и немеченого соединения (chase)
-
Механизм импульсного анализа
- Меченое соединение включается в исследуемую молекулу или систему
- Соединение проходит метаболические пути и используется в синтезе продукта
- Пример: радиоактивно меченая форма лейцина доставляется в бета-клетки поджелудочной железы для синтеза инсулина
-
Фаза chase
- Вводится избыток немаркированного вещества (chase)
- Выработка инсулина продолжается, но без радиоактивного лейцина
- Меченый инсулин можно отследить внутри клетки
-
Применение импульсного анализа
- Определение активности клеток в течение длительного периода времени
- Изучение протеинкиназы С, убиквитина и других белков
- Доказательство существования и функционирования фрагментов Окадзаки
- Джордж Пэлейд использовал метод для выяснения секреторного пути