Двухгибридный скрининг
-
Основы двухгибридного скрининга
- Двухгибридный скрининг — это метод, используемый для изучения белок-белковых взаимодействий.
- Он основан на использовании двух гибридных белков, которые экспрессируются в одной клетке.
- Метод позволяет идентифицировать белки, которые взаимодействуют друг с другом, и может быть использован для изучения различных биологических процессов.
-
История и развитие
- Двухгибридный скрининг был разработан в 1980-х годах и стал популярным методом для изучения взаимодействий между белками.
- Он был усовершенствован и адаптирован для различных биологических систем, включая дрожжи, бактерии и клетки млекопитающих.
-
Применение в различных биологических системах
- В дрожжах используется система Y2H, которая позволяет изучать взаимодействия между белками, которые экспрессируются в ядре.
- В бактериях используются системы B2H и BTH, которые позволяют изучать взаимодействия в больших библиотеках белков.
- В клетках млекопитающих используется система M2H, которая имитирует естественную среду и позволяет изучать взаимодействия в более естественных условиях.
-
Преимущества и недостатки
- Двухгибридный скрининг является высокопроизводительным методом, который может быть автоматизирован.
- Однако он может давать большое количество ложноположительных результатов из-за особенностей экспериментальных систем.
-
Применение в исследованиях
- Двухгибридный скрининг используется для определения последовательностей, важных для взаимодействий, открытия лекарств и ядов, а также для определения функций белков.
- Он также применяется для отбора белков цинкового пальца для белковой инженерии.
-
Выбор протеина «цинковый палец»
- Для отбора белков цинкового пальца используются методы, адаптированные на основе двухгибридного скрининга.
- ZFP сам по себе является ДНК-связывающим белком, который используется для создания пользовательских ДНК-связывающих доменов.
- Система UAS позволяет отбирать клетки, в которых происходит взаимодействие ZFP с желаемыми характеристиками.
- Пересказана только часть статьи. Для продолжения перейдите к чтению оригинала.
Полный текст статьи: