Оглавление
Фракционирование клеток
-
Фракционирование клеток
- Процесс разделения клеточных компонентов
- Сохранение индивидуальных функций каждого компонента
- Демонстрация клеточного расположения биохимических процессов
- Обеспечение обогащенного источника белка для очистки
- Облегчение диагностики болезненных состояний
-
Гомогенизация
- Ткань гомогенизируется в буферном растворе
- Измельчение, фарширование, шинковку, изменение давления, осмотический шок, замораживание-оттаивание, ультразвук
- Образцы выдерживаются в холодном состоянии для предотвращения повреждения ферментами
- Образование однородной массы клеток (клеточного гомогената или клеточной суспензии)
- Измельчение клеток в подходящей среде с ферментами, правильным рН, ионным составом и температурой
- Пример: пектиназа расщепляет среднюю пластинку растительных клеток
-
Фильтрация
- Может быть необязательным в зависимости от источника клеток
- В тканях животных образуется соединительная ткань, которую необходимо удалить
- Фильтрация осуществляется заливкой через сетку или с помощью всасывающего фильтра и керамического фильтра
-
Очистка
- Достигается дифференциальным центрифугированием
- Последовательное увеличение силы тяжести приводит к разделению органелл по плотности
-
Дополнительные ресурсы
- Разрушение клеток
- Среда для разделения клеток по плотности: Перколь, Фиколл