Оглавление
- 1 Генетический нокаут
- 1.1 Нокаут генов
- 1.2 Типы нокаутов генов
- 1.3 Применение нокаутов генов
- 1.4 Ограничения нокаутов генов
- 1.5 Методы нокаута генов
- 1.6 Процесс нокаутирования генов с помощью CRISPR
- 1.7 Типы нокаутов
- 1.8 Преимущества и риски
- 1.9 Примеры использования
- 1.10 Ограничения и предостережения
- 1.11 Примеры успешных применений
- 1.12 Дополнительные методы
- 1.13 Применение нокаутов
- 1.14 Полный текст статьи:
- 2 Генный нокаут
Генетический нокаут
-
Нокаут генов
- Метод генной инженерии для удаления или инактивации гена в организме
- Включает гомологичную рекомбинацию, CRISPR-Cas9 и TALENs
- Позволяет изучать функцию гена in vivo и роль в развитии и физиологии
-
Типы нокаутов генов
- Полный нокаут навсегда инактивирует ген
- Условный нокаут позволяет отключать и включать ген в определенное время или в тканях
-
Применение нокаутов генов
- Используется в бактериях, дрожжах, плодовых мушках, рыбках данио-рерио и мышах
- Применяется для изучения рака, неврологических расстройств, иммунных расстройств и нарушений обмена веществ
-
Ограничения нокаутов генов
- Потеря одного гена может не полностью имитировать последствия генетического расстройства
- Нокауты могут иметь непреднамеренные последствия для других генов или проводящих путей
- Геном мыши не идентичен геному человека, что ограничивает применение нокаутов для лечения заболеваний человека
-
Методы нокаута генов
- Нокаут гена путем мутации у бактерий
- РНК-интерференция (RNAi) для подавления экспрессии генов
- Гомологичная рекомбинация для введения сконструированной мутации в ген
- Сайт-специфичные нуклеазы для создания двухцепочечного разрыва в ДНК
- Цинковые пальцы и TALENs для точного воздействия на ДНК
- CRISPR/Cas9 для точного редактирования генома
-
Процесс нокаутирования генов с помощью CRISPR
- Создание направляющей РНК (gRNA)
- Доставка gRNA и фермента Cas9 в клетку-мишень
- Восстановление разреза в ДНК
-
Типы нокаутов
- Условные нокауты: удаление гена в ткани специфичным образом
- Внедрение гена: замена одного гена другим
-
Преимущества и риски
- Мощный инструмент для изучения генетической основы заболеваний
- Потенциальные вредные воздействия на организм
-
Примеры использования
- Изучение функции генов у различных организмов
- Разработка новых методов лечения
-
Ограничения и предостережения
- Непреднамеренные или вредные воздействия на организм
- Необходимость осторожного использования
-
Примеры успешных применений
- Уничтожение гена, связанного с депрессией и тревожностью у мышей
- Модификация гена через гематоэнцефалический барьер
-
Дополнительные методы
- Использование сайт-специфичной рекомбиназы Cre
- Создание других рекомбиназ для экспериментов
-
Применение нокаутов
- Понимание роли генов и участков ДНК
- Скрининг при разработке лекарств
- Понимание механизма действия лекарственных средств