Скачки в хромосомах
-
Хромосомный скачок
- Инструмент молекулярной биологии для физического картирования геномов
- Используется для обхода труднодоступных участков хромосом
- Позволяет быстро перемещаться по хромосоме в поисках гена
-
Процесс хромосомного скачка
- Клонирование двух концов последовательности ДНК без среднего участка
- Геномная ДНК частично расщепляется эндонуклеазой рестрикции
- Фрагменты циркулируют в низкой концентрации с помощью ДНК-лигазы
- Праймер используется для секвенирования по кольцевому соединению
-
Библиотека скачущих хромосом
- Отличается от библиотеки ходячих хромосом манипуляциями перед клонированием
- Включает идентификацию клонов из случайных точек генома или рестрикционных фрагментов
-
Пример создания библиотеки
- Эндонуклеаза NotI используется для создания библиотеки
- Библиотека разделена на фракции с низкой и высокой концентрацией плазмид
- Клоны анализируются с помощью рестрикционного картирования и гибридизации
-
Преимущества и недостатки
- Быстрое перемещение по геному
- Возможность перемещения по неклонируемым участкам
- Генерация геномных маркеров
- Ограничение емкостью вектора клонирования
- Необходимость перемещения хромосом для идентификации всех генов
-
Приложения
- Лечение генетических нарушений, таких как муковисцидоз
- Идентификация муковисцидоза затруднена из-за интронов и повторяющихся ДНК
- Традиционные методы клонирования не справляются с этими осложнениями