Оглавление
Дифракция электронов на микрокристаллах
-
История и развитие MicroED
- Метод разработан лабораторией Гонена в 2013 году
- Используется для определения структуры белков из нанокристаллов
- Основан на дифракции электронов на микрокристаллах
-
Принцип работы
- Кристаллы замораживаются гидратированными
- Используются просвечивающие электронные микроскопы в режиме дифракции
- Кристалл непрерывно вращается, дифракция записывается на камеру
- Данные обрабатываются с помощью программного обеспечения для рентгеновской кристаллографии
-
Аппаратное и программное обеспечение
- Используются стандартные и широко доступные приборы и программное обеспечение
- Применяются детекторы CCD и CMOS
-
Сбор данных
- Неподвижная дифракция: данные собираются с одного кристалла с дискретным шагом
- Непрерывное вращение: кристалл медленно вращается, дифракция записывается на видео
-
Обработка данных
- Используются протоколы обработки данных MicroED
- Данные обрабатываются с помощью стандартного программного обеспечения для кристаллографии
-
Различия с другими методами
- ADT использует дискретные шаги наклона угломера и прецессию луча
- RED использует наклон луча для заполнения пробелов
-
Применение метода
- Используется для определения структуры белков, пептидов, мембранных белков, органических и неорганических соединений
- Наблюдались водород и заряженные ионы
-
Примеры структур
- Первые структуры α-синуклеина при болезни Паркинсона
- Первая новая структура белка R2lox из Sulfolobus acidocaldarius