Моноклональное антитело
-
Моноклональные антитела
- Получены из клеточной линии, клонированной из уникальных белых кровяных телец
- Обладают одновалентным сродством к одному эпитопу
- Используются для диагностики и терапии заболеваний
-
История
- Идея Зауберкугеля предложена Паулем Эрлихом в начале 1900-х годов
- В 1973 году Джерролд Швабер описал получение моноклональных антител
- В 1984 году Джордж Келер и Сезар Мильштейн получили Нобелевскую премию за создание гибридом
- В 2018 году Джеймс П. Эллисон и Тасуку Хондзе получили Нобелевскую премию за метод лечения рака
-
Производство
- Гибридомы создаются путем слияния клеток плазмы/плазмобластов с клетками миеломы
- Используются селективные среды для роста гибридом
- Гибридомы могут выращиваться в культуре клеток или вводиться мышам
-
Новые технологии
- Разработаны новые технологии создания моноклональных антител, такие как фаговый дисплей и культивирование отдельных В-клеток
- Эти технологии используют методы молекулярной биологии для амплификации генов антител
-
Очистка
- Образцы очищаются от загрязнителей, таких как факторы роста и гормоны
- Используются методы центрифугирования, фильтрации и ультрафильтрации
- Ионообменная хроматография применяется для разделения заряженных примесей
- Аффинная хроматография белков A/G является быстрым методом разделения
-
Методы очистки антител
- Антитела связываются с белком A/G для достижения высокой чистоты.
- Суровые условия могут повредить антитела, поэтому используются буферные системы с высокой концентрацией соли.
- Аффинная очистка с использованием антигена обеспечивает максимальную чистоту.
-
Гетерогенность антител
- Гетерогенность характерна для моноклональных антител и других рекомбинантных продуктов.
- Варианты включают агрегаты, продукты дезаминирования и гликозилирования.
- Для выявления и характеристики вариантов используется вытеснительная хроматография.
-
Рекомбинантные антитела
- Производство включает клонирование репертуара, CRISPR/Cas9 и технологии отображения фагов/дрожжей.
- Библиотеки фаговых антител повышают специфичность и стабильность антител.
- Для крупномасштабного производства используются ферментационные камеры.
-
Химерные антитела
- Мышиные антитела вызывают иммунный ответ у людей, что приводит к их быстрому выведению.
- ДНК мыши, кодирующая связывающую часть антитела, объединена с ДНК человека.
- Экспрессия химерной ДНК в культуре клеток позволяет получить частично мышиные, частично человеческие антитела.
-
Человеческие антитела
- Ученые стремятся создать полностью человеческие препараты для уменьшения побочных эффектов.
- Используются трансгенные мыши, фаговый дисплей и клонирование отдельных В-клеток.
-
Стоимость и приложения
- Производство моноклональных антител дороже из-за сложных процессов и затрат на исследования.
- Антитела используются в диагностических тестах, аналитическом и химическом применении, а также в терапии.
-
Терапевтическое применение
- Моноклональные антитела блокируют функции молекул-мишеней и индуцируют апоптоз.
- Примеры включают алемтузумаб, бевацизумаб, цетуксимаб и другие.
- Используются при аутоиммунных заболеваниях, таких как ревматоидный артрит и болезнь Крона.
-
COVID-19
- В 2020 году Управление по контролю за продуктами и лекарствами США выдало разрешения на экстренное применение бамланивимаба/этесевимаба и казиривимаба/имдевимаба.
- В сентябре 2021 года администрация Байдена закупила моноклональные антитела на сумму 2,9 миллиарда долларов для сокращения дефицита.
-
Эффективность моноклональных антител против Омикрона
- Тесты in vitro показали, что терапия моноклональными антителами, кроме сотровимаба и тиксагевимаба/цилгавимаба, вероятно, не эффективна против Омикрона.
- В кокрейновских обзорах 2021-22 годов не найдено достаточных доказательств эффективности нейтрализующих моноклональных антител против COVID-19.
-
Разрешение на применение пемивибарта
- В марте 2024 года пемивибарт получил разрешение на экстренное применение в США для доконтактной профилактики COVID-19 у лиц с ослабленным иммунитетом.
-
Побочные эффекты моноклональных антител
- Некоторые моноклональные антитела, такие как бевацизумаб и цетуксимаб, могут вызывать различные побочные эффекты.
- Побочные эффекты включают головокружение, головные боли, аллергию, диарею, кашель, лихорадку, зуд, боль в спине, общую слабость, потерю аппетита, бессонницу и запор.
- Серьезные побочные эффекты включают анафилаксию, кровотечение, образование тромбов, аутоиммунный тиреоидит, гипотиреоз, гепатит, сердечную недостаточность, рак, анемию, уменьшение количества белых кровяных телец, стоматит, энтероколит, перфорацию желудочно-кишечного тракта и мукозит.