Обратная генетика
-
Обратная генетика
- Метод молекулярной генетики для понимания функций генов
- Анализ фенотипических эффектов генной инженерии
- Противоположен классической генетике
-
Методы обратной генетики
- Направленные удаления и точечные мутации
- Сайт-направленный мутагенез
- Создание нулевых аллелей
- Условные аллели
- Обработка почвы
-
Подавление генов
- РНК-интерференция (RNAi)
- Нокдаун генов с помощью морфолиноолигосов
- Эффективность зависит от клеточных компонентов
-
Вмешательство с использованием трансгенов
- Создание трансгенных организмов
- Сверхэкспрессия нормального гена
- Избыточная экспрессия мутантных форм
-
Синтез вакцины
- Создание новых генотипов вирусных штаммов
- Ослабленные вакцины
- Использование плазмид для синтеза ослабленных вирусов
-
Вакцина против гриппа
- Система из восьми плазмид
- Синтез кДНК вирусной РНК
- Котрансфицирование в клетку-мишень
-
Процесс создания вакцины
- Внутри клетки-мишени ферменты Pol I и Pol II транскрибируют вирусную кДНК.
- Синтезируются вирусная РНК отрицательного и положительного смысла.
- Создается ослабленный вирус, похожий на существующий штамм.
- Вакцинный штамм используется для создания дальнейших вакцин.
-
Преимущества обратной генетики
- Высокая скорость производства.
- Возможность быстро разработать необходимый генотип.
- Живой вирус обладает более высокой иммуногенностью.
-
Недостатки обратной генетики
- Возможны осложнения у пациентов с иммунодефицитом.
- Существует вероятность мутации вируса в неаттенуированный штамм.