Оглавление
- 1 Окрашивание
- 1.1 Окрашивание в микроскопии
- 1.2 Биохимия и флуоресцентная маркировка
- 1.3 Биологическое окрашивание
- 1.4 Световые микроскопы
- 1.5 Окрашивание in vivo и in vitro
- 1.6 Обратное пятно
- 1.7 Подготовка образцов
- 1.8 Прямое и непрямое окрашивание
- 1.9 Пермеабилизация и монтаж
- 1.10 Стандартизация красителей
- 1.11 Отрицательное окрашивание
- 1.12 Положительное окрашивание
- 1.13 Простое и дифференциальное окрашивание
- 1.14 Методы окрашивания
- 1.15 Окрашивание по Граму
- 1.16 Окрашивание эндоспор
- 1.17 Окрашивание по Цилю-Нильсену
- 1.18 Окрашивание гематоксилином и эозином (H&E)
- 1.19 Окрашивание по Папаниколау
- 1.20 Периодическая кислота Шиффа
- 1.21 Трихром Массона
- 1.22 Окрашивание по Романовскому
- 1.23 Окрашивание серебром
- 1.24 Окрашивание по-судански
- 1.25 Окрашивание Виртца-Конклина
- 1.26 Окрашивание коллаген-гибридизующим пептидом
- 1.27 Распространенные биологические пятна
- 1.28 Кристаллический фиолетовый и DAPI
- 1.29 Эозин
- 1.30 Бромид этидия
- 1.31 Кислотный фуксин
- 1.32 Гематоксилин
- 1.33 Пятна от Хохста
- 1.34 Йод
- 1.35 Малахитово-зеленый
- 1.36 Метиловый зеленый
- 1.37 Метиленовый синий
- 1.38 Нейтральный красный
- 1.39 Голубой Нил
- 1.40 Нильский красный
- 1.41 Четырехокись осмия
- 1.42 Йодид пропидия
- 1.43 Родамин
- 1.44 Сафранин
- 1.45 Окрашиваемость тканей
- 1.46 Электронная микроскопия
- 1.47 Фосфорно-вольфрамовая кислота
- 1.48 Четырехокись осмия
- 1.49 Четырехокись рутения
- 1.50 Другие химические вещества
- 1.51 Иммуногистохимия
- 1.52 Жизненно важные пятна
- 1.53 Бариевая клизма
- 1.54 Диафонизация
- 1.55 Комиссия по биологическим окрашиваниям
- 1.56 Справочник по красителям и методам окрашивания
- 1.57 Кстати, о фиксации
- 1.58 Микрофотографии гистологических пятен
- 1.59 Полный текст статьи:
- 2 Окрашивание – Arc.Ask3.Ru
Окрашивание
-
Окрашивание в микроскопии
- Метод усиления контраста в образцах
- Используется в гистологии, цитологии и медицине
- Определяет биологические ткани, клеточные популяции и органеллы
-
Биохимия и флуоресцентная маркировка
- Добавление красителя для определения соединений
- Флуоресцентная маркировка аналогична окрашиванию
-
Биологическое окрашивание
- Маркировка клеток при проточной цитометрии
- Маркировка белков и нуклеиновых кислот при гель-электрофорезе
-
Световые микроскопы
- Используются для просмотра окрашенных образцов
- Применяются яркое поле и эпифлуоресцентное освещение
-
Окрашивание in vivo и in vitro
- In vivo: окрашивание живых тканей
- In vitro: окрашивание клеток или структур вне биологического контекста
-
Обратное пятно
- Делает клетки или структуры более заметными
- Кристаллический фиолетовый окрашивает грамположительные и грамотрицательные организмы
-
Подготовка образцов
- Влажные крепления для наблюдения за живыми организмами
- Фиксация для сохранения формы клеток или тканей
- Протравы для превращения красителей в пятна
-
Прямое и непрямое окрашивание
- Прямое: без протравливания
- Непрямое: с помощью протравы
-
Пермеабилизация и монтаж
- Обработка клеток поверхностно-активным веществом
- Прикрепление образцов к предметному стеклу микроскопа
-
Стандартизация красителей
- Использование красителей, сертифицированных BSC
- Устранение неожиданных результатов
-
Отрицательное окрашивание
- Удаление бактерий с помощью нигрозина или индийских чернил
- Кислотные красители, не подходят для изучения патогенов
-
Положительное окрашивание
- Основные красители, окрашивают образец на ярком фоне
- Чаще используется в микробиологии
-
Простое и дифференциальное окрашивание
- Простое: один тип краски, один цвет
- Дифференциальное: несколько пятен, разные цвета для разных организмов
-
Методы окрашивания
- Грамм: определение статуса по граму, классификация бактерий
- Другие методы: окрашивание по Граму, техника маневра, метод шипения
-
Окрашивание по Граму
- Грамотрицательные микроорганизмы выглядят красными или розовыми из-за обратного окрашивания.
- Пористость клеточной стенки увеличивается после обработки алкоголем, что позволяет красителю проникать внутрь.
- Грамотрицательные бактерии имеют несколько слоев пептидогликана и вторичную клеточную мембрану.
-
Окрашивание эндоспор
- Используется для определения наличия или отсутствия эндоспор.
- Споры трудно окрашивать, но новые методы сокращают время окрашивания.
- Окрашивание включает малахитовый зеленый и сафранин.
-
Окрашивание по Цилю-Нильсену
- Кислотостойкое окрашивание для микобактерий туберкулеза.
- Используются карболфуксин и метиленовый синий.
-
Окрашивание гематоксилином и эозином (H&E)
- Гематоксилин окрашивает ядра в синий цвет, эозин – цитоплазму в розовый.
- Эозин хорошо окрашивает красные кровяные тельца.
-
Окрашивание по Папаниколау
- Разработано для замены тонкоигольной аспирационной цитологии.
- Использует гематоксилин, оранжевый G, эозин Y и другие красители.
-
Периодическая кислота Шиффа
- Используется для маркировки углеводов.
- Применяется на тканях печени и других органах.
-
Трихром Массона
- Технология трехцветного окрашивания.
- Кератин и мышечные волокна окрашиваются в красный, коллаген и кости – в синий или зеленый, цитоплазма – в светло-красный, ядра – в черный.
-
Окрашивание по Романовскому
- Полихромное окрашивание с эозином плюс и деметилированным метиленовым синим.
- Используется для исследования клеток крови и выявления паразитов.
-
Окрашивание серебром
- Используется для выявления белков и ДНК.
- Применяется при гелевом электрофорезе.
-
Окрашивание по-судански
- Используется для окрашивания суданофильных веществ, часто липидов.
- Применяется для определения уровня фекального жира.
-
Окрашивание Виртца-Конклина
- Используется для окрашивания эндоспор.
- Включает малахитовый зеленый и сафранин.
-
Окрашивание коллаген-гибридизующим пептидом
- Позволяет окрашивать денатурированные коллагены.
- Визуализируется с помощью флуоресцентного микроскопа.
-
Распространенные биологические пятна
- Акридиновый оранжевый используется для определения клеточного цикла.
- Бисмарк браун окрашивает кислые муцины и тучные клетки.
- Кармин окрашивает гликоген, карминовые квасцы – ядра.
- Кумасси бриллиантовый синий окрашивает белки в синий цвет.
- Крезиловый фиолетовый окрашивает кислые компоненты цитоплазмы нейронов.
-
Кристаллический фиолетовый и DAPI
- Кристаллический фиолетовый окрашивает стенки клеток в фиолетовый цвет
- DAPI связывается с ДНК и проявляет синюю флуоресценцию
- DAPI используется для подсчета клеток
-
Эозин
- Эозин окрашивает цитоплазматический материал и клеточные мембраны
- Существует два типа эозина: эозин Y и эозин В
- Эозин Y имеет слабый желтоватый оттенок, эозин В – слабый голубоватый оттенок
-
Бромид этидия
- Бромид этидия окрашивает ДНК, образуя красно-оранжевое пятно
- Используется для идентификации клеток на завершающей стадии апоптоза
- Комбинируется с акридиновым апельсином для подсчета жизнеспособных клеток
-
Кислотный фуксин
- Используется для окрашивания коллагена, гладких мышц и митохондрий
- Применяется в трихромном методе Мэллори и трихроме Массона
- Содержится в пикрофуксине Ван Гизона
-
Гематоксилин
- Окрашивает ядра в сине-фиолетовый или коричневый цвет
- Используется вместе с эозином при окрашивании H&E
-
Пятна от Хохста
- Связываются с малой бороздкой ДНК
- Используются во флуоресцентной микроскопии
- Существует два типа: Hoechst 33258 и Hoechst 33342
-
Йод
- Используется для окрашивания крахмала
- Применяется в методе окрашивания по Граму
- Раствор Люголя используется для выявления предраковых изменений
-
Малахитово-зеленый
- Используется для окрашивания спор
- Применяется в технике окрашивания бактерий Хименесом
-
Метиловый зеленый
- Используется для окрашивания хроматина клеток
- Применяется в яркопольных и флуоресцентных микроскопах
-
Метиленовый синий
- Используется для окрашивания клеток животных
- Применяется для окрашивания пленок крови
-
Нейтральный красный
- Окрашивает вещество Ниссля в красный цвет
- Используется в качестве подкраски
-
Голубой Нил
- Окрашивает ядра в синий цвет
- Используется с живыми клетками
-
Нильский красный
- Окрашивает липиды в красный цвет
-
Четырехокись осмия
- Используется для окрашивания липидов
- Растворяется в жирах и разлагается до элементарного осмия
-
Йодид пропидия
- Используется для окрашивания ДНК
- Применяется в проточной цитометрии и микроскопии
-
Родамин
- Флуоресцентный краситель для белка
- Используется во флуоресцентной микроскопии
-
Сафранин
- Связывается с ядрами и другими тканевыми полианионами
- Не путать с шафраном
-
Окрашиваемость тканей
- Хромосомы названы из-за способности поглощать фиолетовые пятна
- Ткани могут быть азурофильными, ацидофильными, базофильными или амфофильными
-
Электронная микроскопия
- Окрашивания используются для усиления контраста
- Применяются электронно-плотные соединения тяжелых металлов
-
Фосфорно-вольфрамовая кислота
- Используется для негативного окрашивания вирусов, нервов и полисахаридов
- Применяется в форме с рН 5-2%
-
Четырехокись осмия
- Применяется для морфологии в биологической электронной микроскопии
-
Четырехокись рутения
- Летуч и агрессивен, окрашивает даже устойчивые материалы
- Применяется для окрашивания полимеров
-
Другие химические вещества
- Включают молибдат аммония, йодид кадмия и другие
- Используются для окрашивания в электронной микроскопии
-
Иммуногистохимия
- Использование антисыворотки для маркировки специфических антигенов
- Трис рутения(II) (дисульфонат батофенантролина) как белковый краситель
-
Жизненно важные пятна
- Пятна, которые не убивают клетки
-
Бариевая клизма
- Разновидность окрашивания in vivo
- Создает контраст в рентгеновской части светового спектра
-
Диафонизация
- Рекомендации
- Дальнейшее чтение
- Внешние ссылки
- Ресурсы в вашей библиотеке
- Ресурсы в других библиотеках
-
Комиссия по биологическим окрашиваниям
- Независимая некоммерческая компания
- Проводит испытания красителей с начала 1920-х годов
- Выдает сертификаты одобрения на партии красителей
-
Справочник по красителям и методам окрашивания
- Жизненно важное окрашивание для простейших
- Методы временной фиксации
-
Кстати, о фиксации
- Часть 1 и часть 2
- Автор М. Халит Умар
-
Микрофотографии гистологических пятен
- Часто задаваемые вопросы по упражнениям по окрашиванию
- Домашняя страница Шридхара Рао П.Н.