Южное пятно
-
Основы Саузерн-блоттинга
- Саузерн-блоттинг — метод молекулярной биологии для анализа нуклеиновых кислот.
- Используется для определения размера и локализации фрагментов ДНК.
- Основан на гибридизации ДНК с мечеными зондами.
-
Процесс Саузерн-блоттинга
- ДНК фрагментируется и гибридизуется с зондами.
- Зонды помечены радиоактивным изотопом или флуоресцентным красителем.
- Гибридизация происходит в агарозном геле, после чего гель переносится на мембрану.
- Мембрана обрабатывается антителами, которые связываются с зондами, образуя полосы.
-
Применение Саузерн-блоттинга
- Используется для клонирования на основе гомологии.
- Скрининг библиотек ДНК и других коллекций клонированных фрагментов.
- Анализ нормальной хромосомной или генной перестройки.
- Идентификация сходных последовательностей у других видов.
- Определение метилированных участков в генах.
-
Ограничения Саузерн-блоттинга
- Сложная методика с дорогостоящим оборудованием и реагентами.
- Требует высокого качества и большого количества ДНК.
- Полуколичественный метод, не выявляет мутации на уровне пар оснований.
-
Рекомендации
- Статья содержит текст из источника, который находится в открытом доступе.
Полный текст статьи: