Высокоэффективная жидкостная хроматография
-
Основы ВЭЖХ
- ВЭЖХ — это метод разделения, основанный на различии в скоростях движения молекул в подвижной и неподвижной фазах.
- ВЭЖХ используется для анализа биомедицинских и фармацевтических образцов, а также для определения качества лекарственных средств.
-
Типы колонок и неподвижных фаз
- Колонки делятся на обращенно-фазовые (RP) и нормально-фазовые (NP).
- Неподвижные фазы могут быть на основе силикагеля, полимерных гидрофобных частиц или гибридного кремнезема.
- Время удерживания анализируемых молекул зависит от типа неподвижной фазы и условий разделения.
-
Принцип работы RP-ВЭЖХ
- RP-ВЭЖХ использует гидрофобные взаимодействия для разделения молекул.
- Время удерживания увеличивается с увеличением гидрофобности анализируемых молекул.
- Градиентное элюирование позволяет автоматически изменять полярность подвижной фазы для улучшения разделения.
-
Факторы, влияющие на удерживание
- Структурные свойства молекул, такие как площадь гидрофобной поверхности, влияют на время удерживания.
- рН подвижной фазы может изменять гидрофобность анализируемых веществ.
- Буферные агенты и органические кислоты могут улучшать хроматографическое разрешение.
-
Проблемы и уход за колонками
- Колонки с обращенной фазой могут быть чувствительны к гидролизу при экстремальных значениях рН.
- После использования колонки следует промывать и хранить в соответствующих растворителях.
- Для некоторых биомедицинских приложений требуются неметаллические среды.
-
Методы эксклюзионной хроматографии
- SEC позволяет разделять молекулы на основе различий в молекулярном размере.
- Существуют два типа SEC: ГПХ и GFC, которые различаются по типу анализируемых молекул и растворителям.
- Принцип разделения основан на проникновении молекул в поры неподвижной фазы.
- Пересказана только часть статьи. Для продолжения перейдите к чтению оригинала.
Полный текст статьи: