Цитратсинтаза
-
Структура и функция цитратсинтазы
- Цитратсинтаза (E.C. 2.3.3.1) — фермент, присутствующий в митохондриях эукариот.
- Кодируется ядерной ДНК, синтезируется в цитоплазме и транспортируется в митохондрии.
- Используется как маркер наличия интактных митохондрий.
-
Механизм реакции
- Катализирует конденсацию ацетил-КоА и оксалоацетата с образованием цитрата.
- Оксалоацетат связывается первым, затем ацетил-КоА.
- Гидролиз тиоэфира высвобождает кофермент А, способствуя конденсации.
-
Структура и активный центр
- Состоит из двух субъединиц, каждая из которых содержит 20 альфа-спиралей.
- Активный центр содержит три ключевых остатка: His274, His320 и Asp375.
- Активный сайт содержит два участка связывания: для цитрата и оксалоацетата, а также для кофермента А.
-
Ингибирование и регуляция
- Ингибируется высоким соотношением АТФ:ADP и NADH:NAD.
- Ингибируется сукцинил-КоА и пропионил-КоА.
- Цитрат ингибирует реакцию, что является примером ингибирования продукта.
- Эксперименты показали существование единого активного центра, который чередуется между лигазной и гидролазной активностью.
- Может использовать морфеиновую модель аллостерической регуляции.